《表1 各目的片段的引物及其产物长度》

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《南美白对虾肠道内乳酸菌的分离鉴定及其对抗生素的耐药性》

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以菌株基因组DNA为模板，含有该抗性基因的环境样为阳性对照，选取了水产品中检出率较高的6类18种ARGs：四环素类ARGs（tec A、tec B、tec C、tec E、tec G、tec G'、tec M），磺胺类ARGs（sulⅠ、suⅡⅠ），喹诺酮类ARGs（qnr A、qnr S、gyr A），氯霉素类ARGs（flo R、catⅡ），氨基糖苷类ARGs（str A、str B、aad A），大环内酯类ARG（erm B）。PCR反应体系（25 uL）为：基因组DNA 1 u L，上下游引物各1 u L，2×Taq Master Mix 12.5μL，dd H2O 9.5μL。PCR反应程序：95℃预变性10 min、95℃变性30 s、Tm退火30 s、72℃延伸30 s，35个循环，72℃延伸5 min。用1%的琼脂糖电泳检测扩增产物，将可能含有目的条带的PCR产物送广州天一辉远测序公司进行测序，得到测序序列进一步与NCBI数据库相比对，确定是否含有ARGs。各目的片段上下游引物序列见表1，本研究所用引物均由广州天一辉远测序公司合成。不同引物所需扩增反应的退火温度不同，根据其Tm值确定扩增反应的退火温度。