《表1 各基因引物序列及产物片段长度》

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《玫瑰茄水提物抗贫血作用的研究》

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在1.5 m L EP管中加入相同量的（约0.5μg）模板RNA，1μL Oligo（d T）18/u6 RT primer/mir21 RT primer引物，加入DEPC水，使得最终的体积为12μL，离心2 min。65℃水浴5 min后，放置冰上进行冷冻，再次短暂离心后，加入4μL 5×reaction Buffer，1μL Ribolock TM Ribonuclease Inhibitor，2μL（10 mmol）d NTP mix，1μL（200 U/μL）Rever Aid M-MuLV反转录酶，最终总反应体积为20μL。样液离心后，42℃水浴60 min进行反转录；在70℃条件下，将逆转录酶水浴灭活5 min，然后停止反应，冰上冷冻后-20℃保存，或马上PCR操作。根据专业软件计算得出的Ct值，以β-actin为内参，每组均与低铁对照组进行比较，采用2-△△Ct的方法进行半定量分析。各基因引物序列设计如表1所示。