《表1 基因引物序列及产物长度》

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《人卵巢颗粒细胞分离培养的优化及生物学特性》


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收集颗粒细胞,PBS洗3遍,采用说明书操作提取颗粒细胞总RNA,应用分光光度计检测RNA纯度(A260/A280=1.8~2.0)。反转录得到cDNA,进行PCR反应。扩增条件:95℃预变性3 min,95℃变性10 s,60℃退火1 min。72℃延伸1 min,40个循环。GAPDH作为内参,通过2-??Ct法对各组基因mRNA表达量进行统计。引物由上海生工生物工程股份有限公司合成(表1)。