《表1 引物序列及目的片段长度》

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《新疆昭苏地区马梨形虫病病原及抗体检测》


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严格按照组织全血DNA提取试剂盒说明书,对858份马全血进行核酸提取。马泰勒和马驽巴贝斯虫特异性引物,参照宋瑞其提供的方法[13],由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。PCR反应体系(25μL):2×Taq PCR Green Mix 12.5μL,上、下游引物(10μmol/L)各1.0μL,模板DNA 2.0μL,灭菌双蒸水补充至25μL。马泰勒虫反应条件:95℃5min;94℃30s,55℃30s,72℃45s,72℃10min,共35个循环;马驽巴贝斯虫反应条件为:95℃5min;94℃30s,56℃30s,72℃45s,72℃10min,共35个循环;扩增产物取5μL上样,进行琼脂糖凝胶电泳。查看琼脂糖凝胶电泳结果后,将疑似马驽巴贝斯虫及马泰勒虫阳性PCR产物,送至昆泰锐测序公司进行测序。