《表2 引物序列、目的片段及登录号》

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《脂多糖刺激后不同时间断奶仔猪空肠上皮细胞铁死亡的变化规律》

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空肠黏膜细胞相关关键基因包括膜蛋白转铁蛋白受体1（TFR1）、热休克蛋白B1（HSPB1）、铁反应元件结合蛋白2（IREB2）（铁死亡信号通路正调控） ；谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、胱氨酸/谷氨酸反向转运体亚基（SLC7A11）（铁死亡信号通路负调控） 。以上基因mRNA表达量采用实时定量PCR（Real-time PCR）法测定，根据已在NCBI上发表的猪的基因序列，用Primer premier 6.0软件设计Real-time PCR引物，再由北京擎科新业生物技术有限公司合成（表2）。用于合成的cDNA模板，采用20μL反应体系:10.0μL SYBR?Premix Ex TaqTM（2×），0.4μL ROX reference dye II（10×），2.0μL cDNA，6.8μL RNase free dH2O，上、下游引物（10μmol/L）各0.4μL。使用ABI 7500 Real-time PCR仪进行扩增。循环参数:首先95oC 30 s；随后进行95oC 5 s，60oC 34 s，40个循环。每份样本做3个重复。本试验将GAPDH作为内参基因，各基因的mRNA表达量采用2-DDCT相对定量法计算，各基因的mRNA相对表达量用归一化法处理，以相对于对照组的表达量表示。