《表3 ddPCR体系：食品中Escherichia coli O157:H7微滴数字PCR绝对定量检测方法的建立》

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《食品中Escherichia coli O157:H7微滴数字PCR绝对定量检测方法的建立》

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取1.3.2.1节过夜培养物原液至10-8稀释度菌液提取的DNA同时进行ddPCR检测。将20μL的ddPCR预混液（表3）和70μL微滴生成油分别加入到8孔微滴生成卡中，置于微滴生成仪中生成微滴。将生成的油包水的微滴（40μL）缓慢转移至96孔板中，封膜后置于PCR仪上进行扩增反应（升降温速率≤2.5℃/s):95℃预变性10 min；94℃变性30 s；55℃退火及延伸1 min，45个循环；98℃固化微滴10 min；4℃反应结束。将扩增后的96孔板置于微滴读取仪中，利用QuantaSoft软件进行结果读取和分析。