《表3 单突变位点的ΔTm、T50、t1/2和比酶活》

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《基于多重计算设计策略提高枯草芽孢杆菌脂肪酶的热稳定性》


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进一步测定了热稳定性提高的点突变的T50和t1/2及所有单点突变的酶活,结果如表3所示。Tm值上升的点突变T50值均得到提高,最低提高了0.8℃,最高提高了1.5℃。t1/2只有F17A和M137A得到了提高,分别提高了0.4 min和1.2 min。此外,热稳定性提高的6个单点突变体均有酶活,其中L114P的比酶活增加了22%,I135V比酶活降低了26%;A20I和M134L热稳定性有所降低,但酶活分别增加了22.7%和48.8%;M78W和I157A突变位点靠近催化三联体中的S77和H156,且突变不符合进化保守性,导致剩余酶活不足20%。