《表1 不同底物的动力学参数》

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《桔黄赛多孢菌胞外胰蛋白酶的酶学特性》


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根据米氏方程的计算规则,结合图3B中各曲线拟合生成的方程式,计算Vmax、Km和Kcat值(表1)。各底物所对应的最大反应速率与反应效率一致,b LSTR所对应的反应速率Vmax最大,平均每秒水解所产生的MCA为29.94μmol/L,Lys底物的最大反应速率仅为b LSTR的1/4。米氏常数Km反应了酶与底物的亲和力大小,Km越小,表明酶进行反应所需的底物浓度越低,bLSTR对胰蛋白酶有很好的亲和力(图3A),达到最大反应速率一半所需的底物浓度为11.94μmol/L,之后各底物的Km值不断增加,说明它们对酶的亲和力减弱,与各底物的反应效率一致。Kcat/Km值反应了不同酶或同一种酶催化底物的催化效率。胰蛋白酶对b VLK的催化效率(Kcat/Km)低于其他底物,表明其对bVLK的水解能力最小。