《表1 引物序列:5-氮杂胞苷对桦褐孔菌多酚积累的影响》

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《5-氮杂胞苷对桦褐孔菌多酚积累的影响》


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采用荧光定量聚合酶链反应(quantitative real‐time PCR,qRT‐PCR)检测桦褐孔菌合成多酚的相关基因表达水平。收集桦褐孔菌菌丝体并在液氮中研磨,利用TRIzol(TaKaRa,Japan)法提取不同培养条件和培养时间菌丝体内的RNA。然后利用反转录试剂盒将mRNA反转录为cDNA(TaKaRa,Japan)。使用SYBR?Green Supermix(Roche)进行RT‐PCR,相关引物见表1。以肌动蛋白基因作为内参基因,以未添加5‐AC的培养物中靶基因的表达值为对照,利用2‐△△CT法计算目的基因的相对表达水平(Livak&Schmittgen2001)。实验过程中每组样品均做3个生物重复。