《表1 引物设计：TRAAK离子通道第4次跨膜结构对其机械敏感性的作用》

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《TRAAK离子通道第4次跨膜结构对其机械敏感性的作用》

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嵌合突变体M4-chimera的构建：分别以质粒pIRES-TWIK-1-EGFP和pIRES-TRAAK-EGFP为模板，表1中的M4-chimera-F1/R1和M4-chimera-F2/R2为引物进行PCR扩增得到两个目的片段，将目的片段进行凝胶回收，使用同源重组酶进行连接，转化然后挑菌、摇床培养，通过测序和序列比对得到新构建的质粒；分别以新构建的质粒和pIRES-TRAAK-EGFP为模板，表1中的M4-chimera-F3/R3和M4-chimera-F4/R4为引物扩增得到两个目的片段，然后通过凝胶回收、连接和转化等过程得到嵌合突变体M4-chimera.