《表1 叶绿素降解相关基因实时荧光定量PCR分析》

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《1-MCP对‘玉露香’梨采后果实品质和叶绿素保持的影响》

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RNA提取按照Gasic等（2014）的方法，参照反转录试剂盒（TaKaRa生物制药公司，大连）说明，将RNA提取物进行反向转录。实时荧光定量PCR（Relative quantitative real-time，RT-PCR）在ABI 7500荧光定量仪上完成。各差异基因序列根据转录组数据获得，利用Primer3在线设计引物（表1），3次生物学重复。反应体系为：SYBR Premix Ex TaqTM(Ta Ka Ra，日本）12.5μL，上、下游定量引物各1μL，dd H2O 8.5μL，c DNA 2.0μL，共计25μL。反应条件为：95℃预变性30 s，95℃变性5 s，56℃退火延伸30 s，40个循环。数据分析采用ABI7500 system软件和2-??CT法（Hong et al.，2010）。