《表1 PCR引物序列：核受体结合因子2对自噬起始复合物PI3KC3-C1活性的调节作用》

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《核受体结合因子2对自噬起始复合物PI3KC3-C1活性的调节作用》

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根据前期质谱实验结果，得知NRBF2属于可磷酸化蛋白，主要磷酸化位点为丝氨酸113和丝氨酸120[17]。据此构建了针对NRBF2的S113和S120位点的去磷酸化突变质粒（由丙氨酸代替丝氨酸，即NRBF2-AA质粒）、磷酸化突变质粒（由天冬氨酸代替丝氨酸，即NRBF2-DD质粒），及NRBF2野生型质粒，同时构建了Atg14-flag重组质粒。Vps34-myc、p150-HA及Beclin1-HA 3种质粒由西南医学中心钟清实验室惠赠。实验中设计的引物序列见表1。重组反应完成后，将产物转化感受态细胞DH-5α，提取质粒并进行测序验证。