《表1 PCR引物序列:六味地黄汤和桂附地黄汤对小剂量氢化可的松减停给药后致小鼠药源性虚证的调节作用》

《表1 PCR引物序列:六味地黄汤和桂附地黄汤对小剂量氢化可的松减停给药后致小鼠药源性虚证的调节作用》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《六味地黄汤和桂附地黄汤对小剂量氢化可的松减停给药后致小鼠药源性虚证的调节作用》


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取小鼠肾上腺组织,加入trizol试剂抽提总RNA,应用Prime Script RT试剂盒进行逆转录制备cDNA,逆转录反应体系为40μL,反应程序为37℃15 min,85℃5 s,4℃终止。扩增反应体系为20μL,反应程序为95℃变性3 min,95℃退火30 s,60℃延伸30 s,40个循环。扩增引物由Primer3(v.0.4.0)在线软件设计、美国Life Technologies公司合成,引物序列见表1。各组均设4个复孔,目的基因分别为肾上腺类固醇合成急性调节蛋白(Star),胆固醇侧链裂解酶(Cyp11a1),细胞色素P450家族21亚家族A多肽1(Cyp21a1),细胞色素P450家族11亚家族b多肽1(Cyp11b1),低密度脂蛋白受体(Ldlr),B类I型清道夫受体(Scarb1/SRBI),3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(Hmgcr),酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶-1(Acat1),激素敏感性脂肪酶(HSL/Lipe),胰岛素诱导基因1(Insig1),固醇调节元件结合转录因子2(Srebf2),采用2-ΔΔCt法计算分析目的mRNA相对表达量。