《表1 PCR引物序列:血府逐瘀汤与加味二陈汤对小鼠非酒精性脂肪肝的作用比较》

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《血府逐瘀汤与加味二陈汤对小鼠非酒精性脂肪肝的作用比较》


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血府逐瘀汤:桃仁36 g,红花、生地黄、当归、牛膝27 g,赤芍、枳壳、甘草片18 g,川芎、桔梗13.5 g,柴胡9 g。加味二陈汤:法半夏、橘红、全瓜蒌、薤白45 g,茯苓27 g,炙甘草18 g,生姜3片、乌梅3个,药材均购自广州臻品医药有限公司,批号181101,以上中药饮片均由广州中医药大学王剑教授鉴定符合2015年版《中国药典》规范。蒸馏水浸泡30 min,煎煮3次,滤液浓缩为含生药量1 g·mL-1。高脂饲料(北京华阜康生物科技有限公司,批号H10141);总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL),高密度脂蛋白(HDL)生化试剂盒,丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶联免疫吸附测定(ELISA)检测试剂盒(南京建成生物科技有限公司,货号分别为A111-1-1,A110-1-1,A113-1-1,A112-1-1,C009-2-1,C010-2-1);苏木素-伊红(HE)染色试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司,批号C0105);基质金属蛋白酶-9(MMP-9),单核细胞趋化因子-1(MCP-1)抗体(英国Abcam公司,货号分别为ab58803,ab7202);鼠抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)单克隆抗体(北京博奥森生物工程有限公司,货号分别为bsm-33207m,bs-0812R);抗β-tublin鼠单克隆抗体,山羊抗小鼠免疫球蛋白(Ig)G二抗,山羊抗兔IgG二抗,trizol总RNA提取试剂(北京康为世纪生物科技有限公司,货号分别为CW0098M,CW0102,CW0103,CW0580);全蛋白提取试剂盒(强)(北京索莱宝科技有限公司,批号BC3710);BCA蛋白定量试剂盒(广州速聚生物科技有限公司,批号UW0202C);SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(上海碧云天生物技术有限公司,批号P0015L);一步法凝胶制备试剂盒(杭州弗德生物科技有限公司,货号FD346);0.45μm PVDF膜(美国Millipore公司,批号IPVH00010);StarScriptⅡcDNA第一链合成预混试剂(含去基因组),2×预混实时荧光定量快速PCR反应体系(北京康润科技有限公司,货号分别为A224-02,A301-10);小鼠MMP-9,IL-1β,TNF-α,MCP-1,甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)引物序列由生工生物工程(上海)股份有限公司设计完成,引物序列见表1。