《表1 qRT-PCR引物序列》

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《SH2B1在非小细胞肺癌中的表达水平及与临床病理参数和预后的关系》

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参照Trizol说明书提取总RNA，应用Bio Rad逆转录试剂盒逆转录为cDNA，逆转体系为10μL(2μL 5x Reaction mix，1μL Random primer，0.5μL逆转录酶，5μL RNA样品），25℃5min，42℃30 min，85℃5 min灭活逆转录酶活性，用去离子水将cDNA稀释10倍后-20℃保存。进行qRT-PCR操作，程序设定为95℃预热3 min，95℃30 s，60℃30 s，72℃15 s，上述3步骤35次循环，72℃5 min终止反应。其中SH2B1 mRNA以GAPDH为内参基因，引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，引物设计见表1。采用2-ΔΔCt算法计算SH2B1 mRNA相对表达量。