《表2 野生大豆14-3-3蛋白GsGF14s基因特异引物》

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《野生大豆阳离子质子转运体CHX19.3与14-3-3蛋白的相互作用研究》

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采用Trizol法提取野生大豆幼苗总RNA，经DNase消化基因组DNA后，反转录获得c DNA。以cDNA为模板，采用含酶切位点的基因特异引物（表2），用高保真聚合酶PCR扩增野生大豆GsGF14s基因CDS区，PCR产物采用试剂盒回收。将PCR产物和pPR3-N质粒分别进行双酶切，连接后转化大肠杆菌感受态细胞。对阳性菌落进行PCR鉴定，提取质粒进行双酶切验证，并将阳性克隆送交测序。