《表4 候选区域内的24个开放阅读框》

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《水稻粉质皱缩胚乳突变体fse4的表型分析与基因克隆》

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利用fse4杂合植株（FSE4fse4）与籼稻品种Dular杂交配组，从F2群体中挑选与突变体亲本表型一致的粉质皱缩种子，用于FSE4的精细定位。使用79个隐性个体将FSE4定位于第5染色体长臂，分子标记I5-9和N5-29之间约13 c M区间内（图5-A）。进一步利用1568个隐性个体将区间限定在TI2和TI6之间约252 kb区间内（图5-B）。通过RiceXPro网站预测，该区间内含有24个开放阅读框（Open reading frames，ORFs）（表4）。测序发现，突变体fse4的Os05g0455500基因第一个外显子上出现单碱基替换：编码区的第47个碱基由G突变为A，导致编码的精氨酸突变为组氨酸。NCBI网站预测，Os05g0455500编码Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（Delta1-pyrroline-5-carboxylate synthetase，P5CS），基因组长6716 bp，包含19个外显子，18个内含子（图4-C），编码区（Coding sequence，CDS）长2151 bp，编码一个包含716个氨基酸残基的蛋白。根据以上结果，将OsP5CS定为FSE4的候选基因。