《表1 构建Atg3 gRNA相关引物序列》
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《自噬相关基因Atg3在埃博拉病毒组装过程中的作用研究》
在GenBank中检索Atg3的基因序列,根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,将PAM序列(NGG)前20个碱基设定为靶向目的基因的向导RNA(guide RNA,gRNA)序列。根据候选gRNA序列的特异性,在Atg3第四外显子区域选定合适的gRNA序列(图1),人工合成两条寡核苷酸链,在正义链模板的5'端添加CAGG,反义链模板的3'端添加AAAC,以在退火之后形成与BbsⅠ酶的黏性末端互补的末端(表1)。
图表编号 | XD00101536000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.11.01 |
作者 | 刘鑫、王斌、姚晓雨、郑永辉、范春玲 |
绘制单位 | 黑龙江八一农垦大学动物科技学院、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-美国密歇根州立大学天然免疫联合实验室兽医生物技术国家重点实验室、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-美国密歇根州立大学天然免疫联合实验室兽医生物技术国家重点实验室、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-美国密歇根州立大学天然免疫联合实验室兽医生物技术国家重点实验室、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-美国密歇根州立大学天然免疫联合实验室兽医生物技术国家重点实验室、黑龙江八一农垦大学动物科技学院 |
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