《表1 基因的引物序列：以LPS构建IPEC1细胞损伤模型及相关指标的测定》

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《以LPS构建IPEC1细胞损伤模型及相关指标的测定》

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将消化后的细胞转移到12孔板中培养。每个处理4个重复。待贴壁细胞量达到60%～70%时，用含有不同浓度LPS的培养液处理不同时间，收集细胞培养液，用于测定LDH活性。LDH活性采用LDH试剂盒检测。贴壁细胞用TRIzol处理，用于mRNA测定。按照TRIzol试剂的说明，样品经过提取、沉淀清洗、溶解等步骤，提取得到总RNA。按照反转试剂盒说明，反转得到cDNA。再运用Real-time PCR试剂盒，测定紧密连接蛋白和炎症相关基因的mRNA表达量[11]。数据分析是以β-actin为内参，采用Livak等[12]的2-ΔΔCt法进行计算。Real-time PCR引物序列见表1。