《表1 引物序列:不同结扎材料对慢性压迫性损伤模型胶质细胞活化的影响》
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《不同结扎材料对慢性压迫性损伤模型胶质细胞活化的影响》
脊髓组织加入Trizol(25~50 mg组织加入500μL)后研磨粉碎,加入氯仿(1/5 Trizol体积),离心取上清,加入异丙醇(1/2Trizol体积),离心后弃上清,加入75%乙醇(等于Trizol体积)后吹干。取少量RNA进行浓度测定。根据测定的浓度进行稀释,按照试剂盒说明进行去除基因组DNA反应后,进行20μL体系的逆转录反应,反应条件为:37℃15 min,85℃5 s,4℃60 min。按照PCR试剂盒说明书中的Fast Real-time PCR System进行操作。采用50μL体系,反应条件为:预变性条件:95℃30 s;PCR反应条件:40,95℃5 s,60℃30 s。以GAPDH为内参,采用2-△△CT法进行数据的相对定量分析,ΔΔCT=待测样品中目的基因ΔCT—参照样品中目的基因ΔCT,表示目的基因mRNA的相对表达量。引物序列如表1。
图表编号 | XD00150910300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.08.20 |
作者 | 王琛、陈鹏、林东升、陈弋、吴智兵、林兴栋 |
绘制单位 | 广州中医药大学第一临床医学院、贵州中医药大学基础医学院、广州中医药大学第一临床医学院、广州中医药大学第一临床医学院、广州中医药大学第一附属医院、广州中医药大学第三附属医院 |
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