《表1 引物序列：MSH5抑制对恶性胶质瘤细胞表型的影响》

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《MSH5抑制对恶性胶质瘤细胞表型的影响》

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U251、SHG-44和SNB-19胶质瘤细胞转染MSH5干扰慢病毒48 h后，检测MSH5 mRNA的表达，以检测敲降效率。根据说明书，用Trizol试剂（Invitrogen，美国）提取总RNA。将沉淀的RNA溶于20μL DEPC水中。用Nan-odrop分光光度计测定RNA含量。将总RNA逆转录成cDNA(Takara，日本）。以DNA为模板，β-actin为内参，按照说明书加入反应体系，在ABI 7500 Fast系统上检测MSH5的表达。引物序列由Primer 3在线软件设计，Invitrogen公司合成（表1），用2-△△Ct法计算和分析基因相对表达情况。