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第一章绪论1

一、目的和意义1

目 录1

二、培养基2

三、培养条件3

四、培养物菌龄8

五、纯培养8

第二章定期移植保藏法9

一、说明9

二、设备9

三、方法与步骤10

四、保存11

五、优缺点12

(一)原理13

第三章冷冻真空干燥法13

一、说明13

(二)条件要求15

二、设备15

(一)冷冻真空干燥装置和真空熔封装置15

(二)安瓿管18

(三)保护剂19

三、方法与步骤19

(一)安瓿管及保护剂的准备19

(二)菌种的培养和细胞悬浮液的制备20

(三)分装20

(四)冷冻真空干燥21

(一)失重法23

(五)真空下密封23

四、冻干样品含水量的测定23

(二)Karl Fisher氏化学滴定法24

五、保存26

六、复苏培养28

七、冷冻真空干燥保藏菌种制作程序流程图28

八、影响生物存活的因素29

(一)生物的类别30

(二)培养条件和菌龄31

(三)悬浮液的浓度31

(四)保护剂32

(五)冻结33

(七)真空度34

(六)干燥程度34

(八)保存条件35

(九)复苏培养35

第四章L-干燥法36

一、说明36

二、设备36

三、保护剂37

四、方法与步骤38

五、保存39

六、复苏培养40

七、L-干燥其他制备法40

(一)Annear氏法40

(三)IFO法41

(二)NCIB法41

八、效果42

第五章液氮超低温冻结保藏技术44

一、说明44

(一)低温生物学中所遇到的几个温度范围45

(二)冻结和解冻45

(三)低温对生物膜的影响49

(四)冻结和解冻后细胞存活力49

(五)冻结损伤的机理51

二、设备52

(一)液氮发生器52

(二)液氮贮存罐52

(三)液氮生物贮存罐52

(四)控制冷却速度装置53

(五)安瓿瓶56

(六)铝夹56

三、低温保护剂57

四、慢速冻结与快速冻结58

五、方法与步骤59

(一)准备工作60

(二)细胞悬浮液的制备60

(三)分装61

(四)冻结61

(五)保存61

六、解冻及复苏培养61

七、防护62

二、设备64

第六章矿油封藏法64

一、说明64

三、方法与步骤65

四、注意事项66

第七章其他干燥保藏法68

一、砂或土壤保藏法68

二、明胶片保藏法70

三、袋装薄片干燥法71

四、梭氏(Sordelli)干燥保藏法72

五、硅胶保藏法73

六、麸皮保藏法75

七、滤纸保藏法76

一、说明78

第八章蒸馏水或其他溶液保藏法78

二、方法与步骤79

第九章重要微生物菌种的培养条件和保藏法80

一、细菌80

二、放线菌83

三、酵母菌87

四、小型丝状真菌89

五、担子菌96

附录Ⅰ 培养基97

附录Ⅱ 保护剂109

附录Ⅲ低温保护剂110

参考文献111

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