《表1 引物序列：毛竹Phyllostachys edulis retrotransposon 7(PHRE7)转座子的克隆与鉴定》

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《毛竹Phyllostachys edulis retrotransposon 7(PHRE7)转座子的克隆与鉴定》

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采用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法从毛竹嫩叶中提取毛竹基因组DNA[20]，根据PHRE7的侧翼序列设计1对克隆引物（PHRE7-F和PHRE7-R，具体序列见表1）。以毛竹提取DNA作为克隆模板，运用以上设计的克隆引物进行PCR扩增。具体扩增反应体系设计为:LA Taq酶0.5μL，PHRE7-F和PHRE7-R各0.8μL，2×GC缓冲液（buffer）25.0μL，三磷酸碱基脱氧核苷酸混合液（d NTP mix）4.0μL，DNA 100 ng，加无菌水补齐50.0μL。具体反应条件设计为:预变性95℃5min；变性94℃30 s，退火44℃30 s，延伸72℃5 min，35个循环；终延伸72℃10 min，4℃保存。将PCR产物在质量分数为1%琼脂糖电泳中分离，PCR产物连接到pMD20-T克隆载体上，胶回收目的片段并送生物公司测序。