《表6 PCR引物的序列和长度》

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《基于网络药理学的栀子抗胆汁淤积的作用机制研究》


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每组选取6只大鼠的肝脏样本,称取肝脏组织约50 mg经液氮冷冻处理,加液氮磨成细粉,按RNA Extraction Kit1200试剂盒操作,提取肝脏总RNA,测定RNA纯度,将总RNA逆转成cDNA模板产物,将2μL cD-NA中加入10μL SYBRPremix Ex TaqTMⅡ(2×)、上下游引物各(引物列表见表6)0.8μL(10μmol·L-1)、0.4μL ROX Reference Dye(50×)、无酶水6μL,混合成20μL的反应体系,在95℃条件下扩增,预变性10 s,95℃变性5 s,1个循环,PCR扩增60℃30 s,40循环,结果用GAPDH归化,运用2-ΔΔCt法计算各基因的表达值,分析核心靶点的表达情况。