《表1 PCR引物序列与长度》

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《肾上腺髓质素在幽门螺杆菌感染中的表达调控及其功能的初步研究》


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采用TRIzol法提取细胞和组织中的总RNA,实时荧光定量SYBR Green法检测H.pylori感染的AGS、HGC-27、小鼠胃组织中ADM表达,引物设计见表1。抽提后的RNA经电泳检验RNA无降解,用Nanodrop one微量紫外可见分光光度计测定RNA浓度,根据浓度计算体积后取RNA 500 ng按照逆转录试剂盒步骤以10μL体系进行逆转录。取c DNA在Real-time PCR仪上按照试剂说明以10μL体系进行反应。设复孔取均值,每个样本每个指标重复3次。使用Bio-Rad CFX Manager、Excel和Graph Pad Prism5等软件统计分析数据。