《表1 PCR引物序列及扩增长度》

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《某屠宰场大肠杆菌O26的分离与鉴定》


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大肠杆菌O26血清型阳性的菌株采用多重PCR进行stx1、stx2、eae、hly 4种毒力基因携带情况检测。引物序列如表1所示。PCR反应体系为25μL:10×PCR buffer 5μL,dNTP 4μL,MgCl5μL,4对引物(10μmol/L)mix 9.4μL,Taq酶0.25μL,DNA模板1μL,不足部分用水补齐。PCR反应程序:94℃预变性7min;94℃变性40s,56℃退火40s,72℃退火40s,25个循环;72℃延伸5 min。PCR产物经1.4%琼脂糖凝胶电泳检测。