《表1 一步法RT-PCR扩增体系和扩增程序》

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《猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征混合感染的PCR诊断》


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将采集的病料研磨处理,离心取上清液作为检测样品,利用病毒基因组提取试剂盒(购自北京百泰克生物科技有限公司)提取核酸,参照蒋成砚等[3]的方法分别合成CSFV和PRRSV的特异性检测引物。以提取的检测样品核酸为模板,分别利用CSFV和PRRSV检测引物对其进行一步法RT-PCR扩增(一步法RT-PCR扩增体系和扩增程序详见表1),扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳观察显示扩增片段的大小分别为603 bp(PRRSV)和508 bp(CSFV),这与蒋成砚等[3]的报道结果相符,说明发病猪为CSF和PRRS混合感染,通过实验室PCR检测对病例进行了确诊。