《表1 RT-PCR扩增引物序列》

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《碱性成纤维细胞生长因子拮抗细胞外炎性因子保护软骨细胞》

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取上述4组经炎性因子干预3，5，7 d的软骨细胞，按照TRIzol试剂说明书提取总RNA，并保存于-80℃，按照RT-PCR试剂盒说明书合成c DNA，42℃反应1 h；70℃反应5 min；4℃静置10 min。取2 ng c DNA进行RT-PCR反应，扩增引物见表1，反应条件：95℃3 min，95℃25 s，58℃30 s，72℃30 s，30个循环，72℃8 min，4℃保持。采用2-??Ct法计算m RNA表达，以GAPDH作为内参照基因。