《表1 H9c2细胞凋亡相关因子mRNA表达RT-PCR扩增基因引物序列》

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《参附益心方对血管紧张素Ⅱ诱导H9c2心肌细胞凋亡及线粒体含量、膜电位的影响》

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采用RT-PCR方法检测。Trizol试剂提取心肌细胞总RNA，逆转录为cDNA，GAPDH作为内参基因，分别扩增能量代谢及凋亡相关基因。RT-PCR反应体系为20μl，反应条件:95℃预变性90 s后进行PCR循环，95℃变性10 s，60℃退火30 s，共40个循环；待扩增反应结束，由65℃缓慢加热到95℃，并建立PCR产物的溶解曲线。采用2-△△CT相对定量法计算各组基因表达情况并进行统计分析。引物由江苏金唯智生物科技有限公司合成，具体引物见表1。