《表1 各目的基因的上下游引物序列》
将第二代软骨细胞接种至6孔板进行培养,每孔细胞数量为1.2万个,将其随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,四组细胞的培养方式与上述一致,每组各有3皿,ICA干预5 d后通过qRT-PCR检测细胞Wnt/β-catenin通路相关基因的表达水平。首先采用经典的Trizol法提取各皿细胞的总RNA,然后逆转录合成cDNA第一链,最后进行qRT-PCR,按三步法行qRT-PCR,采用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)基因作为内源性参照物,使用2-ΔΔCT法计算目的基因的相对表达量,引物序列见表1。
图表编号 | XD0081363200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.08.20 |
作者 | 张帅、刘益杰、李瑜琳、李建华、何东仪、褚立希 |
绘制单位 | 上海中医药大学康复医学院、上海市浦东新区中医医院骨伤科、上海中医药大学康复医学院、上海中医药大学康复医学研究所、上海中医药大学康复医学院、上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院推拿科、上海市光华中西医结合医院类风关内科、上海中医药大学康复医学院 |
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