《表1 qRT-PCR中所用的引物信息》

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《玉米GA2ox类基因的发掘及其在苗期干旱胁迫后的表达分析》

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在模拟干旱条件下，对玉米材料B73进行胁迫处理。具体处理方法：在26℃暗培养条件下，将玉米种子置于湿润的脱脂棉上进行诱导发芽；玉米发芽后，选择芽势一致的种子栽种于装填了200 g耕种层土壤（装盆前充分混匀烘干）的培养钵中；单独记录200 g干燥土壤的饱和含水量，此后每天维持土壤含水量在饱和含水量的65%左右，其他培养条件为28℃/22℃（16 h昼/8 h夜），光照强度250μmol/（m2·s），相对湿度60%，培养至3叶1心期；保持光温周期不变，通过停止供水（对照仍维持土壤含水量在饱和含水量的65%左右），进行模拟干旱胁迫，在干旱处理后第3～5天分别取玉米幼苗叶片提取RNA，每组材料至少选取生长一致的6个单株作为生物学重复；选用TransScript All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for q PCR试剂盒（北京全式金生物技术有限公司）进行反转录后获得cDNA；利用qRT-PCR检测B73处理后第3～5天的各ZmGA2ox基因在干旱处理组和对照组间的相对表达变化情况。选取ZmActin2作为内参基因，内参基因和各ZmGA2ox基因的检测引物详见表1，基因的相对表达变化采用ΔΔCt法进行分析。具体qRT-PCR反应体系为，2×SYBR Premix Ex Taq（TAKARA）10μL，上下游引物（10μmol/L）各0.5μL，水7μL，cDNA模板2μL。PCR反应程序为，95℃预变性5 min；95℃变性15 s，60℃退火60 s，共进行40个循环；4℃保存。扩增实验进行3次技术重复。