《表1 qRT-PCR所用引物》

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《禾谷镰孢菌过氧化物酶家族基因的表达规律分析》

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以禾谷镰孢菌β-Actin作为内参基因，利用禾谷镰孢菌过氧化物酶家族基因的特异引物（表1），以H2O2处理的禾谷镰孢菌的cDNA为模板，进行qRT-PCR检测。qRT-PCR体系（10μL）:cDNA模板2μL、Mix 7μL、上下游引物（10μmol/L）各0.5μL。将样品加入96孔板，放入荧光定量PCR仪中进行反应。反应程序为94℃预变性30s；94℃变性5s，55℃退火15s，72℃延伸10s，40个循环。每个样品进行3次重复。以生长7 d的菌丝中基因的转录水平作对照，采用比较Ct值法（2-ΔΔCt法）分析各个基因在菌株H2O2处理下的相对表达水平。