《表1 qRT-PCR所用引物信息》

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《三氧化二砷对肝癌细胞HepG2迁移、侵袭和凋亡的影响》

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取对数生长期HepG2细胞，使用含终浓度为8μmol/L As2O3的完全培养基培养24 h，PBS洗3次，加入含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的RIPA细胞裂解液，收集裂解液并置于冰上30 min使其充分裂解，12 000 g冷冻离心10 min，吸取上清于干净的EP管中。BCA法测定蛋白质浓度，后加入Loading buffer煮沸8 min使其充分变性。取等量蛋白（30μg）加入上样孔，SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白质，电泳结束后将蛋白转印到PVDF膜上，用5%脱脂牛奶封闭2 h后孵育一抗，4℃过夜。TBST洗3次，室温孵育二抗2 h，TBST洗3次后ECL显色，灰度分析处理并进行统计分析。1.2.7 qRT-PCR检测细侵袭和凋亡相关基因表达取对数生长期HepG2细胞，用含终浓度8μmol/L As2O3的完全培养基培养24 h，PBS清洗3次后，按照试剂盒的操作步骤，提取细胞总RNA，将其反转录为cDNA(37℃15 min，85℃5 s）后完成PCR荧光定量（Step 1:95℃30 s；Step 2:95℃5 s，60℃30 s，40个循环；Step 3：溶解曲线）。所用引物序列见表1。