《表1 qRT-PCR实验所用的引物序列》
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取出鱼样的肠道组织，使用Trizol试剂提取总RNA，并用Nanodrop 2000对RNA进行质量浓度与数量的检测，用1%的琼脂糖凝胶电泳检测提取的RNA的完整性[17]．检测合格后使用反转录试剂盒对RNA立即进行反转录．将反转录后的样品以草鱼β-actin（DQ211096.1）作为内参基因[18]，按照SYBR Premix Ex Taq TM试剂盒操作，在ABI 7500 real-time PCR仪上进行qRT-PCR，测定IL-1β、TNF-ɑ、IL-10、ZO-1、Claudin-3的mRNA表达水平．扩增程序:95℃预变性3 min，95℃变性5 s，60℃退火1 min，72℃延伸30 s，循环40次．应用软件Primer Premier 5.0进行引物设计，引物委托广州擎科生物技术有限公司合成，β-actin及相关基因引物和NCBI序列号见表1.
| 图表编号 | XD00118611300 严禁用于非法目的 |
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| 绘制时间 | 2019.12.25 |
| 作者 | 刘海粟、付胜利、邱铭、林妙华、王安利、叶剑敏 |
| 绘制单位 | 华南师范大学生命科学学院∥广东省水产健康安全养殖重点实验室∥广东普通高校生态与环境科学重点实验室∥广东省水产优质环保养殖工程技术研究中心、华南师范大学生命科学学院∥广东省水产健康安全养殖重点实验室∥广东普通高校生态与环境科学重点实验室∥广东省水产优质环保养殖工程技术研究中心、华南师范大学生命科学学院∥广东省水产健康安全养殖重点实验室∥广东普通高校生态与环境科学重点实验室∥广东省水产优质环保养殖工程技术研究中心、华南师范大学生命科学学院∥广东省水产健康安全养殖重点实验室∥广东普通高校生态与环境科学重点实验室 |
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