《表1 qRT-PCR所用的引物》

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《过表达或沉默棉花GhPCBER基因株系的获得及其茎叶木质素和木脂素含量研究》

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提取转基因和野生型拟南芥的叶片（4周）和茎（8周）以及野生型和基因沉默后的棉花叶片和茎的总RNA并反转录为cDNA，拟南芥以肌动蛋白AtActin为内参基因；棉花以UBQ7为内参基因，采用引物设计软件Primer Premier 5.0在基因序列3′端特异性区域设计引物（表1）。利用SYBR Green实时定量PCR染料分别对GhPCBER基因以及苯丙烷代谢途径相关基因的相对表达量进行qRT-PCR分析，包括CCR、PSS、F3 H和F3′5′H。反应体系为（10μL）:模板cDNA 1μL、2×FASTSYBR混合物5μL、上下游引物（10μmol·L-1）各0.2μL、RNase-Free H2O 3.6μL。使用LightCycler 480Ⅱ系统设置反应程序:94℃预变性1min；95℃变性15s，60℃退火15s，72℃延伸20s，45个循环进行qRT-PCR，所得数据按照2-ΔΔCt计算基因的相对表达量。实验中采集每种材料各3组重复样品，每个样品进行3次重复的RNA提取，共计9组实验结果，计算其平均值和标准差。