《表1 RT-PCR引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《应力刺激下TGFβ/Smad信号通路介导成骨细胞功能变化的研究》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

3.TGFβ/Smad及成骨分化相关因子表达检测:①细胞总RNA提取:按照TRIzol试剂盒（Invitrogen公司，美国）说明书步骤进行细胞总RNA的提取，提取所得的总RNA经琼脂糖凝胶电泳质检合格后备用。②引物设计与合成:根据GeneBank中小鼠TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad2、Smad3、Smad4、Smad7、OCN、ALP、COL-I和Runx2基因和GAPDH管家基因序列设计引物，引物由生工生物工程（上海）有限公司设计合成（表1）。③逆转录合成c DNA:采用Takara PrimeScriptRT reagent Kit With g DNA Eraser试剂盒（Takara公司，日本）在FTC2000PCR合成仪上进行逆转录。④实时聚合酶链反应（RT-PCR）:采用Takara SYBRPremix Ex TaqTMII（Tli RNaseH Plus）试剂盒（Takara公司，日本）配置反应体系，在ABI PRISM7300 Fast Real-Time PCR System（Applied Biosystems公司，美国）进行检测，扩增条件均为:95℃，30s（预变性）；95℃，5s，60℃，31s，40个循环（PCR反应）。⑥统计分析:实验结果以平均值±标准偏差的形式表示。采用SPSS17.0软件包，对PCR结果在各个时间点进行单因素方差分析，并在此基础上应用LSD法进行两两比较，规定P<0.05有统计学差异。