《表1 RT-PCR引物序列》

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《肾损伤因子-1在脂多糖诱导的HK-2细胞炎症反应中的作用》

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1.2.3 RT-PCR实验:HK-2细胞经胰蛋白酶消化和悬浮后铺种于6孔板中，铺种密度为105个细胞/孔，处理组分别加入0、10、50和100μg/m L的LPS，转染组加入siRNA转染混合液6 h后更换含有100μg/m L的LPS的完全培养基，37℃，5%CO2培养48 h。按照TRIzol试剂说明书步骤提取RNA，核酸蛋白测定仪检测RNA溶液的OD260/OD280，按照c DNA合成试剂盒说明书步骤进行反转录反应，以及Taq酶混合液产品说明书配置PCR反应液，按表1所示引物序列设定扩增程序并进行PCR扩增反应。扩增完成后用2%的琼脂糖凝胶进行电泳分离，凝胶成像系统拍照后用Image J软件对电泳条带进行灰度值分析，并计算目的基因的相对表达量。