《表1 RT-PCR引物序列》

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《青蒿琥酯对日本血吸虫诱导的早期肝纤维化小鼠热休克蛋白47表达影响的研究》


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取各组小鼠肝组织100 mg,于液氮预冷的研钵中研磨后加入1 ml TRIzol裂解液,提取肝脏总RNA,采用紫外分光光度计检测并计算HSP47、Ⅰ型胶原α1链RNA浓度,按试剂盒说明书进行逆转录。运用Oligo 6软件进行PCR引物设计(引物序列见表1),引物由上海英俊生物技术有限公司合成。PCR反应条件:94℃3 min;94℃30 s,58℃30 s,72℃1 min,共30个循环;72℃10 min。通过管家基因GAPDH(或β-actin)对目标基因mRNA的表达水平进行校正。