《表1 RT-PCR引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《PNPLA5基因敲除对大鼠睾丸形态学及精子运动能力的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

为了检测PNPLA5基因的敲除效果，笔者在RNA水平检测该基因的表达量。将采集的睾丸组织经液氮研磨成粉，放入装有Trizol的EP管中，按照高纯度总RNA快速提取试剂盒说明书提取RNA，提取的RNA用NanoDrop（Thermo Fisher Scientific，USA）测其浓度。每个样品取1μg，经反转录试剂盒反转成cDNA，将cDNA进行RT-PCR扩增。扩增体系:目的基因为E×Taq 10μL，PNPLA5-F 0.2μL，PNPLA5-R 0.2μL，ddH2O8.6μL，cDNA 1μL，共20μL；内参基因扩增体系:E×Taq 10μL，GAPDH-F 0.2μL，GAPDH-R0.2μL，ddH2O 8.6μL，cDNA 1μL，共20μL。引物序列见表1，PCR扩增条件:94℃预变性5min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸1min，共34个循环；72℃10min。扩增产物经3%琼脂糖凝胶电泳分离条带，凝胶成像系统拍照。