《表1 RT-PCR引物序列》

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《毛樱桃总黄酮对RAW264.7细胞中炎症因子水平的影响及其机制》

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取对数生长期RAW264．7细胞，调整细胞密度为5×105 mL-1，按每孔1mL接种于6孔板培养24h后，细胞分为对照组、模型组、DXM组和不同剂量PTTTF组，每组设置6复孔，PTTTF组给药物终浓度分别为0．4、4．0和40．0mg·L-1，DXM组给药终浓度为0．869 mg·L-1（2μmol·L-1），给药干预4 h，每孔加入LPS（终浓度为1mg·L-1），继续培养24h后，按照试剂盒操作提取总RNA，进行RT-PCR法检测。逆转录条件：72℃、5 min，45℃、50 min；GAPDH扩增条件：94℃、30 s，55℃、30 s，72℃、45s，共30个循环；IL-1β和IL-6扩增条件：94℃、30s，61℃、30 s，72℃、45 s，共32个循环；TNF-α、iNOS和HMGB1扩增条件：94℃、30s，62℃、30s，72℃、45s，共24个循环。将扩增后的产物行琼脂糖凝胶电泳，采用Image 6．0软件进行灰度分析，以目的条带与内参物条带灰度值的比值作为目的基因mRNA表达水平。RT-PCR引物见表1。