《表1 RT-PCR引物序列》

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《GLP-1抑制主动脉瓣膜间质细胞钙化》

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细胞接种于6孔板中。对照组（n=3）用含15%FBS DMEM培养，实验组（n=3）用含有200 ng/mL GLP-1的15%FBS DMEM培养。两者均刺激24 h后，采用TRIzol试剂提取细胞总RNA。通过RT-PCR检测OPN、Runx-2的mRNA表达水平。逆转录采用10μL反应体系。反应条件为:42℃15 min，85℃5 s，4℃保存。PCR扩增体系为20μL（cDNA1μL，上下游引物各1μL，去离子水10μL，cDNA模板1μL，ROX 7μL）；反应条件:95℃，15 s，60℃，1 min，重复40个循环。PCR引物序列见表1。