《表1 酪氨酸酶活性测定的反应液组成及用量Tab.1 Composition and volume of reaction solution for determination of tyrosina

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《苯乙基间苯二酚抑制黑色素形成的机理研究》

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注:底物为L-酪氨酸时，酪氨酸酶的终浓度为200 U/m L，底物为L-多巴时，酪氨酸酶的终浓度为100 U/m L。

根据Choi等[11]的方法进行适当调整，以2.98 mmol/L L-酪氨酸溶液为底物，或以5.1 mmol/L L-多巴溶液为底物，将苯乙基间苯二酚分别配制成不同浓度的溶液，按照表1所示加样于96孔板。于37℃水浴恒温10 min后每孔加入40μL 200 U/m L的酪氨酸酶溶液，在室温避光条件下混匀水浴15 min后迅速置于多功能微孔板检测仪中，测定475 nm处吸光度值，计算酪氨酸酶抑制率，重复上述操作，平行测定3次。用SPSS软件计算IC50值。