《表1反应液的组成:藏荆芥提取物对酪氨酸酶活性及其动力学研究》

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《藏荆芥提取物对酪氨酸酶活性及其动力学研究》


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注:底物为L-酪氨酸或L-多巴,溶剂为PBS-DMSO(体积比为9∶1)混合液,药品为熊果苷、藏荆芥提取物、曲酸或HA。

根据Choi等[14]的方法进行适当调整,总反应体系100μL,反应液的组成如表1所示。利用移液枪分别准确吸取a,b,c,d中的底物、溶剂、药品分别加入到96孔板对应位置上,每个浓度平行做3组,混合均匀,放在25℃的恒温水浴锅里保温10 min,滴入368 U/mL酪氨酸酶溶液后,再将整个盛有液体的96孔板放在37℃恒温水浴锅里保温20 min,然后立即放到酶标仪中,于475 nm处测定吸光度A,依次记为Aa,Ab,Ac,Ad。按1-[(Ad-Ac)/(Ab-Aa)]计算药品抑制酪氨酸酶活力的抑制率。