《表1 qRT-PCR引物序列》

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《基于GABA通路研究川芎素对神经病理性痛大鼠模型的保护作用》


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末次给药24 h后,将每组8只大鼠均脱臼处死,取腰膨大处(L4/5节段)脊髓,迅速放入研钵中,液氮冷冻后充分研磨,用Trizol试剂提取总RNA,再依次进行反转录和qRT-PCR实验,引物见表1,操作均严格按照试剂盒说明书进行。qRT-PCR采用10μl体系:cDNA(50ng/μl)1μl,上下游引物(10μmol/L)各0.5μl,ddH2O 8.0μl。反应条件为:95℃90 s,95℃30 s,63℃30 s,72℃15 s,40个循环。以β-actin作为内参,采用2-ΔΔCt法分析脊髓组织中GABA、GAD、GAT1基因mRNA相对表达水平。