《表1 用于本研究的real-time PCR引物序列》

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《淫羊藿苷对体外牙周膜细胞增殖、成骨分化以及成骨和破骨因子表达的影响》

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在牙周膜细胞中加入异硫氰酸胍裂解细胞，用异硫氰酸胍-酚氯仿法提取总RNA，再用SuperScriptⅢ反转录酶将提取的RNA合成为cDNA。使用SYBR Green PCR Master Mix进行real-time PCR测定选取的基因，包括OCN、Runx2、BMP2、RANKL及GAPDH（引物序列见表1）。每个样本上样至96孔板的3个复孔中，用2-ΔΔCt法进行目的基因的定量分析，使用内参基因β-actin对所有目的基因进行标准化处理。每个样本均重复3次real-time PCR，获得并计算其平均值。