《表1 引物序列:胱硫醚β合酶新型抑制剂的发现和机制研究》
CBS C272A/C275A表达质粒的构建通过使用实验室前期构建的人源的CBS413克隆质粒p GEX-4T-1_CBS413[22]作为模板,设计双突变引物并由上海擎科测序公司合成(序列见表1)来完成。首先使用DNA聚合酶扩增CBS的C272A/C275A片段,通过1%的琼脂糖凝胶电泳检测条带大小及其亮度后,用DpnⅠ内切酶于37℃消化2 h后,转化大肠杆菌感受态细胞JM109,然后涂布于LB固体培养基(含有100μg/m L氨苄青霉素)上,37℃培养箱过夜培养后挑取单克隆于300μL液体LB中培养3~5 h后送至上海擎科测序公司测序鉴定。
图表编号 | XD0075568900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.20 |
作者 | 刘帆、周越洋、吴方、于晶 |
绘制单位 | 上海交通大学生命科学技术学院、上海交通大学系统生物医学研究院、上海交通大学系统生物医学研究院、上海交通大学系统生物医学研究院、上海交通大学生命科学技术学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |