《表1 茶树中脂肪酸代谢途径相关酶基因的引物》

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以不同叶态的mRNA反转录成cDNA为模板,利用qPCR技术对不同叶态中的脂肪酸代谢途径相关基因的表达进行分析。采用DNAMAN 6.0软件设计茶树ADH基因的qPCR引物(表1),以茶树GAPDH为内标基因[31]。反应体系20?μL:1.0?μL?4×diluted?cDNA,10?μL?SYBR?II,0.8?μL上、下游引物和7.4?μL?ddH2O。PCR反应程序:95℃?预变性3?min;95?℃变性30?s,60?℃退火20?s,72?℃延伸30?s,40?个循环;72?℃?延伸10?min。采用2-△△Ct分别计算出相关基因的相对表达量[32]。