《表1 肿瘤干性标志物和糖代谢酶相关基因名称、引物序列》

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《肝肿瘤细胞干性与糖代谢特点的相关性研究》


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RNA提取试剂盒和逆转录试剂盒均购自QIAGEN公司。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)引物由铂尚生物技术(上海)有限公司合成,反应体系为宝日医生物技术(北京)有限公司的TB GreenTM Premix Ex TaqTM,相关引物序列见表1[9-17],RTFQ-PCR反应条件见表2。蛋白质印迹法(Western blot)检测抗体兔抗人HexokinasesⅡ抗体、兔抗人GLUT1抗体、兔抗人PKM2抗体购自美国Cell Signaling Technology公司,兔抗人LDH-A抗体购自美国Abcam公司,鼠抗人β-actin抗体购自美国Intech公司,葡萄糖类似物2-NBDG购自美国Life Technology公司。生成的乳酸含量用美国强生VITROS 5600全自动生化免疫分析仪进行检测。