《表3 500 L发酵毕赤酵母高密度培养表达鸡α干扰素过程稳定性》
在50 L发酵工艺的基础之上,对毕赤酵母工程菌株进行了500 L罐发酵扩大生产,主要考察发酵工艺的稳定性和验证扩大培养后干扰素的抗病毒活性,试验重复5批。结果显示(表3),在最优发酵工艺下,毕赤酵母在500 L发酵罐水平,当发酵24 h,初始碳源耗尽时,菌体湿重为178.9 g/L,此时开始补加甘油,甘油初始流速为3 mL/(L·h),每小时提升1.5单位,5 h后控制流加速度为10~12 mL/(L·h),发酵时间42 h时,菌体湿重为412.3 g/L,此时开始补加诱导剂,干扰素效价开始增加,到发酵96 h时达到最高,为4.5×107U/m L,之后略有下降,菌体湿重有少量增加,之后保持相对稳定的状态,因此发酵时间应控制在诱导表达60 h后放罐。与50 L罐上的各项发酵过程参数相比,500 L罐发酵过程各项目标参数变化趋势与50 L较一致,结果重现性较好,生产过程各项参数较为稳定,且目的蛋白表达量略高于50 L罐,分泌的鸡α干扰素的抗病毒活性最高为4.8×107U/mL,可进行稳定的工业化生产。
图表编号 | XD007024000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.12.05 |
作者 | 曹丁、李学优、肖宏艳、昝继清 |
绘制单位 | 广州市微生物研究所、广州市微生物研究所、广州市微生物研究所、广州市微生物研究所 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |