《表1 AGL基因高拷贝重组毕赤酵母的筛选》

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《"重组α-1,3-葡萄糖苷酶的毕赤酵母表达及发酵优化"》

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注：a表示所有数据经3次所得，均用平均数±方差形式表示。

经过多次转化试验后，分别从2.0 mg/mL、3.0mg/mL的G418抗性平板上挑取20个转化子，依次编码为PKAGL-2-1～PKAGL-2-20，PKAGL-3-1～PKAGL-3-20。活化后进行摇床诱导培养，96 h后取样进行酶反应：以100 g/L麦芽糖（50 mmol/L，p H 7.0的磷酸缓冲液配制）为底物在45℃反应6 h，沸水浴10 min灭酶。经HPLC进样检测后，因产物黑曲霉糖转化率较低，难以进行准确定量，而在前期反应阶段中，黑曲霉糖的转化率与葡萄糖的转化率呈正相关，因此可简单的以体系中检测到的葡萄糖转化率作为筛选高拷贝转化子的相对指标，结果如下页表1所示，选择菌株PKAGL3-14继续进行后续试验。